রাঙিয়ে রঙিন পর্ব ২
🌈🦠 🧫🔬 রাঙিয়ে রঙিন🌈🦠 🧫🔬
পর্ব ২
🔹🔺🔻🔹🔺🔻🔻🔺🔹🔹🔺🔻🔹🔺🔻
প্রথম পর্বের আলোচনায় প্রায় অদৃশ্য স্বচ্ছ জীবাণু রাঙিয়ে নেওয়ার উপায় সম্পর্কে জেনেছি।
প্রথম পর্বের সূত্র::
https://golpokothaybiggayan.blogspot.com/2022/03/blog-post_18.html?m=1
ফেসবুক পেজ এর সূত্র
https://www.facebook.com/groups/871495676323133/permalink/2331279567011396/
কিন্তু সন্তুষ্টি এলো কোথায়? কোষ দেখলাম কিন্তু তার ভিতর কোষীয় অঙ্গাণু গুলি যদি বোঝা যেত কত ভালো হতো?
পার্থক্যমুলক বা differential রাঙানোর প্রয়োজন এইবার এলো।
🌈 পার্থক্যমুলক বা differential staining 🌈
এক বা একাধিক রাসায়নিক রঞ্জক ব্যবহারের মাধ্যমে জীবাণু ও তার বিভিন্ন কোষীয় অঙ্গাণু রঞ্জনের পদ্ধতিই হল পার্থক্যমুলক রঞ্জন।
রাঙিয়ে দেবার জনক বা father of staining
হান্স খ্রিস্টান গ্রাম Hans Christian Gram সাহেব ১৮৮৪ সালে যে পার্থক্যমুলক রঞ্জন পদ্ধতির হদিস দেন তাকে উদ্ভাবকের নাম অনুসারে নাম দেওয়া হয়
গ্রাম রঞ্জন Gram staining।
🌈Gram staining গ্রাম রঞ্জন পদ্ধতি🌈
গ্রাম রঞ্জন পদ্ধতিতে
প্রাথমিক রঞ্জক হিসেবে ব্যবহার হয় Crystal violet স্ফটিক বেগুনি রঞ্জক,
Iodine আয়োডিন mordant তথা তিগ্ম রূপে ওই স্ফটিক বেগুনি রঞ্জক কোষের মধ্যে আবদ্ধ করে।
ইথানল বা acetone অ্যাসিটোন অতিরিক্ত রঞ্জক বিমচিত করে তথা ঈষৎ বিবর্ণ decolorized হতে সাহায্য করে।
পাল্টা রঞ্জক বা counter stain হিসেবে Carbol fuchsin কার্বল ফুচসিন বা সাফরানিন safranin ব্যাবহার করা হয়।
এই পদ্ধতিতে জীবাণু যেমন ব্যাক্টেরিয়া শ্রেণীবিভাগ সম্ভব।
যে সমস্ত জীবাণু বা ব্যাক্টেরিয়া স্ফটিক বেগুনি রঞ্জক ধরে রাখতে সক্ষম হয় তারা গাঢ় বেগুনী বর্ণের দেখায়। এদেরকে গ্রাম রঞ্জন ধনাত্বক বা Gram Positive বলে আখ্যায়িত করা যায়।
কিন্তু কেন তারা এই স্ফটিক বেগুনি রঞ্জক ধরে রাখতে সক্ষম হয়??
ব্যাক্টেরিয়ার কোষপ্রাচীরে অবস্থিত মোটা peptidoglycan পেপটিডোগ্লাইকেন স্তর এই স্ফটিক বেগুনি রঞ্জক ধরে রাখে এবং ইথানল বা acetone অ্যাসিটোন দিয়ে বিবর্ণ করা সম্ভব হয় না।
বলে রাখা ভালো peptidoglycan পেপটিডোগ্লাইকেন হল লম্বা কার্বোহাইড্রেট চেইন দ্বারা গঠিত একটি হেটেরোপলিমার যা ছোট পেপটাইড চেইনের সাথে ক্রস লিঙ্ক করে।
এই ম্যাক্রোমোলিকুল ব্যাকটেরিয়া কোষের সমগ্র বাহ্যিক পৃষ্ঠকে ঘিরে থাকে, এটির একটি "কঠিন জাল" এবং অবিচ্ছেদ্য আকৃতি রয়েছে, তবে এটি একটি দুর্দান্ত স্থিতিস্থাপক ক্ষমতা দ্বারা চিহ্নিত করা হয়।
এইরকম গ্রাম রঞ্জন ধনাত্বক বা Gram Positive ব্যাক্টেরিয়ার উদাহরণ স্বরূপ বলা যায়
গোলাকৃতি cocci কক্কাই যেমন
🔵Staphylococcus aureus
স্ট্যাফাইলোকক্কাস অরিয়াস
🔵Streptococcus pyogenes
স্ট্রেপটোকক্কাস পায়োজেনস।
দন্ডাকৃতি bacilli ব্যাসিলি যেমন
🦠Corynebacterium diphtheriae করনিব্যাক্টেরিয়াম ডিপথেরি
🦠clostridium tetani ক্লোস্ট্রিডিয়াম টেটানি
🦠Listeria monocytogenes লিস্টেরিয়া মনোসাইটোজেনস।
ধনাত্বক যখন আছে তখন স্বভাবতই ঋণাত্মক থাকবে।
যে সমস্ত জীবাণু বা ব্যাক্টেরিয়া প্রাথমিক রঞ্জক যেমন স্ফটিক বেগুনি রঞ্জক ধরে রাখতে সক্ষম নয় বরং পাল্টা রঞ্জক বা counter stain হিসেবে Carbol fuchsin কার্বল ফুচসিন বা সাফরানিন safranin এর বর্ন ধারণ করে তাদের অণুবীক্ষণ যন্ত্রে গাঢ় লোহিত বর্ণে দৃশ্যমান হয়,
এদের গ্রাম রঞ্জন ঋণাত্মক বা Gram Negative বলে আখ্যায়িত করা হয়।
কেন? তাদের প্রাথমিক রঞ্জক ধরে রাখতে সমস্যা কোথায়?
গ্রাম রঞ্জন ঋণাত্মক বা Gram Negative ব্যাক্টেরিয়ার ক্ষেত্রে একটি পেপটিডোগ্লাইকেনের একক স্তর থাকে যা বহিরাবরণ বা bacterial outer membrane এবং অভ্যন্তরীণ কোষ পর্দা বা inner cytoplasmic membrane এর মাঝামাঝি কোনরকমে কূচকে মুচকে থাকে।
তাই এরা পাল্টা রঞ্জকে রঞ্জিত হয়।
এইরকম গ্রাম রঞ্জন ঋণাত্মক বা Gram Negative ব্যাক্টেরিয়ার উদাহরণ
🔬Escherichia coli ইশ্চেরিসিয়া কোলাই
🔬হেলিকোব্যাক্টার পাইলোরি,Helicobacter pylori
🔬Proteus mirabilis প্রোটিয়াস মিরাবিলিস
🔬Salmonella Typhi সালমোনেলা টাইফি।
এখন প্রশ্ন এত খাটাখাটনি করে রং মাখিয়ে লাভ কি? লোকসান কিছু আছে?
🔬🔬লাভ লোকসান খতিয়ান🔬🔬
লাভের লাভ
প্রাথমিক সনাক্তকরণ সম্ভব।
খুবই সহজ ও সস্তা পদ্ধতি।
বিভিন্ন দেহজ তরলের লেপণে (smear) এই পদ্ধতি ব্যাবহার করা যায়।
ব্যাক্টেরিয়ার প্রাথমিক সনাক্তকরণের মূল চাবিকাঠি।
প্রাথমিক সনাক্তকরণ হলে তার চিকিৎসা সম্পর্কে ধারণা করা সম্ভব।
তবে হ্যাঁ এই দুনিয়ায় কোনোকিছুই ধ্রুব নয় সুতরাং এই পদ্ধতিই যে সনাক্তকরণের শেষকথা তা হয়ত বলা যাবে না।
সুতরাং এই পদ্ধতির সীমাবদ্ধতা রয়েছে যেমন
পরিবেশগত অণুজীব বিদ্যায় এর সীমাবদ্ধতা বিদ্যমান। আকার আকৃতি সম্পর্কে ধারণা দিলেও এটি প্রজাতি সম্পর্কে ধারণা দিতে অক্ষম।
Gram variable reaction গ্রাম অধ্র্রুব বিক্রিয়া:
এটি জানা আছে যে, প্রাথমিক রঞ্জক ধারণকারী গ্রাম রঞ্জন ধনাত্বক বা Gram Positive
এবং পাল্টা রঞ্জকে রঞ্জিত গ্রাম রঞ্জন ঋণাত্মক বা Gram Negative।
এখন Gram variable reaction গ্রাম অধ্র্রুব বিক্রিয়াতে গ্রাম রঞ্জন ধনাত্বক ব্যাক্টেরিয়ার পুরাতন
কৃষ্টি বা culture অনেক ক্ষেত্রে প্রাথমিক রঞ্জক ধারণ করে না পরিবর্তে রঞ্জিত হয় পাল্টা রঞ্জকে।
সুতরাং ভুল সনাক্তকরণ সম্ভব।
Archaebacteria আর্কিব্যাকটেরিয়া হল বিশেষ ধরনের এককোষী অণুজীব যাদের কোষ নিউক্লিয়াসের অভাব রয়েছে এবং একারণে এরা প্রোক্যারিওট। এদের কোষ প্রাচীরের গঠন ও রসায়নে যথেষ্ট পার্থক্য রয়েছে, সুতরাং গ্রাম রঞ্জন পদ্ধতি অনুসরণ করে না।
ব্যাক্টেরিয়া নয় হল কিন্তু গ্রাম রঞ্জন পদ্ধতি অন্যান্য অণুজীব যথা প্রোটোজোয়া, ছত্রাক ইত্যাদির ক্ষেত্রে উপযোগী নয়।
ইথানল বা acetone অ্যাসিটোন অনেকক্ষেত্রে আয়োডিন স্ফটিক বেগুনি জটিল যৌগ কে সম্পূর্ন বা আংশিক ধুয়ে দেয়।
সেক্ষেত্রে জীবাণু সনাক্তকরণ ভুল রয়ে যায়।
রাঙানোর আরো রঙিন পদ্ধতি বিদ্যমান যা অনুমতি থাকলে পরবর্তী পর্বে আলোচনা হবে।
চলবে?
বিষয় সাহায্যে
Microbiology
By Pelczar Chan Krieg
Text book of Microbiology
Maheswari Dubey
মন্তব্যসমূহ
একটি মন্তব্য পোস্ট করুন